出峰顺序：极性->弱极性->非极性，反相色谱因其与组分无强烈作用，组分不会长时间滞留污染柱子，且反相色谱用水做底溶剂，掺入其他弱极性、非极性溶剂如乙腈等有机现在是B先出峰，A后出峰。请教高手，同样是C18柱为什么会发生这种出峰顺序颠倒的现象呢？

(｀▽′) c18色谱柱出峰顺序Phone:0755-28502380 C18 色谱柱是一种常用的反相色谱柱，通常用于分离和分析极性较低的化合物。在C18 色谱柱上，化合物的出峰顺序是由它们只要是反相柱不管什么型号的，都是极性大的先出峰。不是这样子的，极性大小与出峰先后只是一般规律，不是必然规律，相同样品相同流动相相同梯度更换不同柱子都能导致出峰顺序颠倒

固定相的不同也可以导致选择性发生变化，氰基柱、苯基柱、C8柱、C18柱等的选择性有很大差异，一般应优先考虑C8柱、C18柱，然后是氰基柱，再次是苯基柱。据统计，近80%的有机物及其中两种C18色谱柱出峰顺序不符合《中国药典》规定。可见氢化可的松琥珀酸钠对于色谱柱固定相的选择性很强。C18色谱柱内部填料的粒度、孔径、键合量及填充的工

建议你的流动相中加入0.1%的h3po4，峰型应该会更好一些，加了酸后保留性会发生变化，苯甲酸出峰C18反相柱能进行手性分离吗？出峰顺序能确定物质吗？网友0 最佳答案回答者：网友不能，固定相本身必须也为手性才行如果固定操作规程，先用成分已知的混合物过一遍柱子